5640是一列开往黔东南州春天的列车，是全国首列扶贫列车。电影围绕这列绿皮火车展开，通过几个主人公跌宕起伏又不乏啼笑皆非的创业故事，表现了黔东南人民脱贫致富的美好愿望与奋斗决心……
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流行乐坛大明星杜明汉（王力宏 饰）虽然功成名就，风头无量，但是内心的空虚却与日俱增，爱情之树更迟迟未能开花结果。一次车祸，让他邂逅了上海音乐学院民乐系的女孩宋晓青（刘亦菲 饰）。明汉为晓青超凡脱俗的气质所吸引，更被她优美绝伦的琴声所打动。在此之后，他和乐团伙伴兼好友魏志柏（陈汉典 饰）经过一番伪装打扮，悄悄潜入音乐学院。在此期间，二人和宋晓青、陶丽（曾轶可 饰）组成四人乐团参加学校的演出，明汉还帮助晓青追求民乐系才子慕凡（乔振宇 饰），期间更是闹出不少笑话。脱去繁华世界的虚伪装扮，明汉重返青涩纯真校园，收